Тесты для определения качества молока

Тест-наборы для молока "4сенсор"

I. Описание

4сенсор - это экспресс метод, который позволяет одновременно выявлять присутствие молекул антибиотиков бета-лактама, тетрациклина, стрептомицина и левомицетина в пробе молока.

II. Краткое изложение протокола

• Добавить 200 мл молока в одну микролунку с реагентами и перемешивать дозатором путем 5-кратного втягивания и выпуска молока до получения гомогенизированного образца.
• Инкубировать 5 мин при температуре 40°C.
• Погрузить по одной тест-полоске в каждую микролунку.
• Продлить инкубацию на 5 мин при температуре 40°C.
• Считать интенсивность цвета.

III. Механизм реакции

4сенсор - это конкурентный метод тестирования с участием специфичных рецепторов и воспроизведенных моноклональных антител в одношаговом действии. Методика требует использования двух компонентов. Первый компонент представляет собой микролунку, содержащую заранее установленное количество как рецепторов, так и антител, связанных с частицами золота. Второй компонент - это тест-полоска, состоящая из набора мембран со специфичными линиями связывания.
Если тест годен к использованию, то верхняя красная контрольная линия должна быть видна после второй инкубации. Четыре других линии – это специфичные тестовые линии, расположенные ниже контрольной линии. Линия для тетрациклина, затем линия левомицетина, стрептомицина и линия бета-лактамов (пенициллины и цефалоспорины), которая расположена в самом низу. Когда реагент из микролунки повторно суспензируется с пробой молока, рецепторы и моноклональные антитела связываются с соответствующими анализируемыми веществами, если таковые присутствуют, в течение первой 5-минутной инкубации при температуре 40°С. После погружения тест-полоски в пробу молока, жидкость начинает мигрировать вверх по тест-полоске и проходит через зоны поглощения. Если проба не содержит антибиотиков, на тестовой линии проявляется цветное окрашивание, указывающее на отсутствие анализируемых веществ в пробе молока. И наоборот, наличие антибиотиков в пробе не приведет к появлению цветного окрашивания на тестовых линиях.

IV. Состав набора

Тест-набор для молока 4сенсор содержит всё, что необходимо для выполнения 96 тестирований:
•12 белых пластиковых сосудов, каждый из которых содержит 1 стрип с 8 реагентными микролунками и 8-ю тест-полосками.
•1 одноканальный дозатор 200 мл.
•«Положительный контроль» - содержит сухое молоко для восстановления «положительного контроля» в виде сырого молока, содержащего пенициллин, (ДГ) стрептомицин, окситетрациклин и левомицетин. Для более простого считывания, «положительный контроль» заранее окрашен в светло-красный цвет.
•«Отрицательный контроль» содержит сухое молоко для восстановления «отрицательного контроля» в виде сырого молока. Для более простого считывания, «отрицательный контроль» заранее окрашен в светло-зеленый цвет.
•Одна инструкция по применению.

V. Дополнительное оборудование, необходимое для проведения тестирования

1 инкубатор (Heatsensor) – инкубация при температуре 40°C, (смотреть руководство по эксплуатации Heatsensor).
1 Считывающее устройство (Readsensor) – (смотреть руководство по эксплуатации).

VI. Общие замечания

1. При использовании считывающего устройства (Readsensor) для считывания результатов, прибор Readsensor должен быть включен до начала исследования (смотреть руководство по эксплуатации устройства).
2. При получении, хранить комплект в сухом месте и при низкой температуре от +2°C до +8°C. Перед тем, как открыть упаковку, необходимо дать возможность пластиковым сосудам достичь комнатной температуры и не допускать воздействия на продукт влаги и света.
3. Стандартные растворы представлены в двух стеклянных флаконах. Растворы должны гидратироваться с 1 мл чистой воды. Тщательно перемешать (рекомендуется вортекс) до получения однородной массы. Восстановленный раствор должен храниться в морозильнике при температуре -20°С. Не замораживать или оттаивать более одного раза.
4. Избегать использования свернувшегося молока вместе с 4сенсором.
5. Наилучшая температура для проведения тестирования - это 40°C ± 3°C. Используйте инкубатор “Heatsensor” (или, в качестве альтернативы) водяную баню. Любой другой вид инкубатора не подходит для использования с методом 4сенсор. (См. инструкцию применяемого инкубатора для установления правильной температуры и расчета времени).
6. После второй инкубации, считайте результаты в течение 5 минутного срока. Не пытайтесь расшифровывать результаты после 5 минут.
7. По мере высыхания яркость цветов линий становится более четкой.
8. В случае получения положительного результата, результаты тестирования должны быть подтверждены дополнительно.
9. Не вскрывайте новый пластиковый сосуд с тест-полосками, не использовав предыдущий полностью.

VII. Восстановление сухого молока

В соответствующей пробирке смешайте 10 г сухого молока с 90 мл теплой (40°С) дистиллированной воды. Для лучшего растворения тщательно перемешайте.

VIII. Общие инструкции (общая методика по использованию)

Данная процедура описывает тестирование либо одной пробы, либо набора из нескольких проб. Во втором случае постарайтесь выполнить тестирование последовательно и избежать задержек во время смешивания реактива и молока, а также во время погружения и удаления тест-полосок. Убедитесь в том, что время инкубации и температура одинаковы для всех проб. Вам не следует тестировать более 8-ми проб одновременно, а в случае наличия более 3-х проб рекомендуется пользоваться многоканальным дозатором. Тестирование более чем 8-ми проб рекомендуется проводить сериями по 8 проб максимально.
1. Выбрать чистое и сухое место для проведения испытаний, а также вымыть и высушить руки перед началом тестирования.
2. Подключить инкубатор (смотреть руководство по эксплуатации) и ждать до тех пор, пока температура стабилизируется на уровне 40°C.
- Потребуется около 10 минут для того, чтобы температура стабилизировалась на уровне 40°C.
3. Перед тем, как открыть реагенты, необходимо вынуть комплект из холодильника и подождать до тех пор, пока температура реагентов достигнет температуры окружающей среды. Тем временем, внимательно прочитайте инструкцию по применению.
- Два основных компонента данного теста - это тест-полоски и лиофилизированные реактивы в микролунках. Оба компонента хранятся в белых пластиковых тубах.
4. Определить, сколько проб молока должно быть протестировано, и написать на каждой пробирке идентификационный номер.
- Проба молока должна быть жидкой и однородной. Ни комков, ни осадков быть не должно. Идеальной для пробы молока считается температура от 4 до 20°C
5. Откройте одну пластиковую тубу и выньте столько микролунок, сколько проб молока необходимо протестировать.
- Для того, чтобы открыть тубу с тест-полосками, снимите защитное кольцо путем нажатия его вниз сосуда, снимите кольцо и откройте пробку.
- туба с тест-полосками должна быть всегда плотно закрыта после того как реактивы были извлечены.
- Прежде чем открывать новую тубу тест-полосками, предыдущая должна быть полностью использована.
- Будьте внимательны, если Вы не намереваетесь использовать все 8 микролунок, оставьте полоску из 8-ми крышек на неиспользованных микролунках и не отрезайте стрип из восьми крышек, а оставьте его на тех микролунках, которые не будут использованы. Не пытайтесь отделить индивидуальные крышки, а сразу же положите их обратно в белую тубу, закройте её и убедитесь в том, что она плотно закрыта.
6. Разместите микролунки в нагревательном блоке, который показывает 40°C.
7. Закрепите новый наконечник на одноканальном дозаторе и внесите 200 мл молока в каждую из микролунок.
8. Внимание!: когда реактивы и молоко вступают в контакт, начинается реакция. Смешайте быстро и НЕЗАМЕДЛИТЕЛЬНО нажмите кнопку START (ЗАПУСК), после чего начинается обратный отсчет 5-ти минут.
- В течение первой инкубации рецепторы и моноклональные антитела выявляют наличие или отсутствие антибиотиков в пробе молока. Для завершения реакции необходимо 5 минут.
9. В течение этого времени откройте ту же тубу, что и прежде, выньте столько тест-полосок, сколько происходит анализов и закройте тубу. Положите тест-полоски на чистый лист и напишите номер, который соответствует номеру пробы молока.
10. По истечению 5-ти минут, т.е. после звукового сигнала, нажмите START (ОСТАНОВКА)* еще раз для того, чтобы остановить звуковой сигнал и погрузите соответствующую тест-полоску в каждую из микролунок, размещенных в инкубаторе.
- Убедитесь в том, что Вы погрузили в микролунку тест-полоску с тем же идентификационным номером, что и номер пробы молока.
11. Включите таймер для второй инкубации путем нажатия кнопки СТАРТ (ЗАПУСК)*. Начинается обратный отсчёт 5-ти минут.
12. По истечении 5-ти минут, т.е. после звукового сигнала, нажмите СТАРТ (ОСТАНОВКА)* еще раз для того, чтобы остановить звуковой сигнал и выньте тест-полоски из микролунки для того, чтобы разместить их на листе бумаги. Удалите пористую подложку, расположенной в нижней части тест-полоски непосредственно после окончания последней инкубации и интерпретируйте результаты как можно быстрее.
13. Если Вы не планируете выполнить какие - либо другие тесты с 4сенсором, убедитесь, что тубы герметично закрыты. Положите всё обратно в коробку и храните ее в холодильнике при температуре от +2 до +8°C.

VIII. Визуальная расшифровка результатов

ВНИМАНИЕ: Ширина или толщина линий не имеет значения! Результат необходимо оценивать ТОЛЬКО по интенсивности (насыщенности) цвета!
14. В первую очередь проверьте, имеется ли в наличии верхняя контрольная линия. Если нет, то примите во внимание, что в данном случае тестирование недостоверно и не начинайте (или не продолжайте) любую расшифровку.
15. Когда контрольная линия видна, расшифруйте четыре тестовые линии следующим образом:
16. Проверяйте по одной тестовой линии за раз и сравните интенсивность цвета тестовой линии с интенсивностью цвета контрольной линии (начните с верхней линии тетрациклина);
• Если тестовая линия имеет более интенсивный цвет, чем контрольная линия, то результат отрицательный, означающий, что исходя из чувствительности теста, проба молока не содержит антибиотики или содержит на более низком уровне;
• Если тестовая линия такая же или светлее по цвету, чем контрольная линия, тогда результат положительный, который, учитывая чувствительность теста, говорит о том, что проба молока содержит антибиотики на уровне или выше указанного в таблице А.
17. После интерпретации одной тестовой линии, проделайте то же самое с другими линиями;
18. Если вы сомневаетесь в полученном результате, тогда считайте что результат ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ и подтвердите вашу интерпретацию путем выполнения второго тестирования или второй интерпретации результатов в течение следующих 5-х минут.
19. Напишите вашу оценку на каждой из тест-полосок.
20. В случае необходимости, тест-полоску можно заархивировать путем удаления пористой подложки, расположенной в нижней части тест-полоски, и просушивания перед архивированием. Примечание: Интенсивность цвета линий потемнеет при просушке.